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实验简介: 药物研究包括吸收、分配、代谢、排泄和毒性等多个方面,而吸收是第一步。这个实验在以内皮细胞通透性、药物渗透等为研究方向的课题中很常用。 常见检测细胞: 人结肠腺*细胞系 Caco-2、HT-29、Lovo、SW-480,人结肠上皮细胞 T84,狗肾上皮细胞系 MDCK,猪肾上皮细胞系LLC/PK1 等,主要模型为上皮细胞吸收、血脑屏障。 具体操作: 上皮细胞生长到细胞汇合度达80-90%时开始实验,不要超过90%,否则会影响到后续细胞单层的形成。将细胞均匀接种在小室膜上。对于24孔板和96孔板的接种密度见本文图示。
c ) 用无血清的冷培养基稀释ECM 胶至2 0 µ g/mL ,以5-10µg/cm2的密度加入到细胞小室的上层(按照ECM产品说明书的推荐比例和体积),轻轻摇晃使胶均匀铺在膜上。以上操 作在冰上进行。 d)立即将铺好ECM胶的细胞小室置于培养板中,于37°C孵育1小时,ECM胶可由液体凝成固体,吸走多余的或者未凝的胶。细胞用PBS清洗一次,EDTA或者0.05%胰酶消化,然后用包含5%BSA的无血清培养基中和,1500rpm离心5-10min。用无血清培养基重悬细胞,调整细胞密度至0.5-2.0x106cell/ml。上海益启生物的Transwell小室询价公司电话。
安全:封闭的真空抽滤设计,完全避免样品飞溅造成的***污染和损失 常用蛋白/核酸纯化、超滤、透析与复性产品 默克密理博提供完备的蛋白、核酸样品制备产品,应用于抽提纯化、浓缩除盐、缓冲液置换及蛋白复性等环节。精巧的设计及稳定可靠的质量,使这些产品成为蛋白和核酸操作中必不可少的基本工具。 主要优点 •Am icon® Pro—体化纯化超濾系统:用于亲和纯化及浓缩换液,配套提供His・Tag、GST・Tag等重组蛋白纯化及抗体纯化等试剂盒 •Amicon®Ultra系列超滤管:行业金标,蛋白/核酸浓缩、除盐、缓冲液置换的优先工具 •D-tubeTM系列透析管:有250uL-15mL处理体积和不同截留分子量等多种规格,用于蛋白复性,使用非常方便、可靠 无菌过滤产品 从细胞培养基的制备到重要药物大分子的除菌,默克密理博所提供的无菌过滤产品将会 是您的理想选择。上海益启生物的添加剂询价公司电话。杨浦区酶细胞培养代理价格
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