白的免疫检测:SNAP i.d.“ 2.0系统与SNAP 1.d.系统(首先代)与标准免疫检测一种。 SNAPi.d。 2.0蛋白质检测b。快照蛋白质检测。标准系统Midi印迹系统首先代,单孔免疫检测对照,茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液(10-0.63 ug)被转移到Immobilon9-P膜上。印迹被阻止含0.5%的非脂肪干mik(NFDM),并在加筋的盐水中制备含0. 1%Tweene 20表面活性剂(TBST),并用主要抗B-Tubulin探测(MAB3408)和次级HRP偶联的山羊蚂蚁(AP1 24P)在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。图2. erbB2的免疫检测:SNAP i.d.9 2.0系统与SNAP i.d.系统(首先代)与标准免疫检测s。 S上海益启生物的WB实验加速器询价公司电话。普陀区Merck仪器代理价格
有关详细信息,请参见表2。●不建议在SNAP i.d. @ 2.0系统中剥离印迹。印迹已被剥离可以从阻塞步骤开始在SNAP i.d.o 2.0系统中对遵循标准协议的系统进行重新探测。●如果不需要剥离(例如,如果使用其他二抗进行检测),则可以重新检测印迹快速清洗后,立即在SNAP i.d.9 2.0系统中使用。 优化准则抗体已经开发了优化指南,以使用户能够转换所用抗体的浓度将标准免疫检测测定法浓缩至适用于SNAP i.d. @ 2.0系统的浓度。大多数用户会能够使用相同量的抗体,但与标准品相比,体积更小,浓度更高免疫检测。但是,当使用扩展抗体方案(第12页)时,可以使用相同的方法通常用于标准免疫检测的一抗的浓度,体积和时间,其次是较高浓度的二抗,持续时间较短。表1.如何根据SNAP i.d.9普陀区Merck仪器代理价格上海益启生物细胞计数器订购方便。
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疫检测对照,茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液(10-0.63 ug)被转移到Immobilon8-P膜上。印迹被阻止补充有0.5%脱脂奶粉(NFDM)的Tris缓冲盐水含0.1%Tweeno 20表面活性剂(TBST),并用一级抗B-Tubulin进行探测(MAB3408)和次级HRP偶联的山羊蚂蚁(AP1 24P)在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。维护SNAP i.d.o 2.0系统清理去除协议每次使用时应清洁SNAP i.d.o 2.0系统。清理去除盐碱中的盐或污染物和管道,抽吸真空并通过系统冲洗散去的水。注:请勿对SNAP i.d.9 2.0系统进行高压灭菌。可以拆卸框架,并用中性清洁剂洗涤,然后用蒸馏水彻底冲洗。风干。要拆卸框架,请使用右侧的蓝色夹子调整框架的方上海益启生物细胞计数器的销售电话。
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Westem HRP基材。高背景分锁不足更改为不同的阻止解决方案。吸笔架不够湿组装前,先将吸墨纸架弄湿。阻塞解决方案可能有始终准备新鲜的0.5%脱脂/低脂干奶。降级的抗体浓度过高降低抗体的浓度。吸笔架朝上放置将印迹架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗涤不足进行至少4次每次30 mL的洗涤。添加清洗剂时,确保真空连续运行缓冲。整个系统电平不一致的信号确保系统在平坦的水平表面上。污点抗体不均匀补充封闭液和抗体稀释剂遍及整个表面0.1%Tween 20表面活性剂。吸墨纸架使用小量移液器(例如5毫升),慢慢散布整个印迹中的抗体。应用至少2.5 mL(用于MultBlot),5 mL(用于Mini blot)或10 mL(用于Midi印迹)抗体。抗体体积低没有抗体回收盘确保抗体中的孔,回收托盘algn普陀区Merck仪器代理价格