上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。 6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。 7. 4,000×g离心15 min。 8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。 9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 * 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。 用Protein A或G对抗体进行亲和纯化上海超滤浓缩管代理销售推荐益启生物公司。江苏Merck超滤浓缩管咨询问价
Minicon®浓缩器 Minicon® 浓缩器用于在电泳或免疫电泳分析前对尿液和脑脊液进行浓缩,以增强对不正常或病态的蛋白质(例如尿中的 Bence Jones 蛋白)的识别。B15型有 8 个浓缩单元,用于 5mL 样本的处理;CS15型有 10 个浓缩单元,适合 2.5mL 样品的处理。溶剂和盐分通过超滤被吸收剂吸收而样品被浓缩。 优点与应用 静态浓缩器,不需要其它辅助装置 浓缩倍数达到 100 倍,样品终体积小 同时浓缩多个临床样品 特别推荐用于尿液、脑脊液等的蛋白 富集分析黄浦区默克4ml超滤浓缩管销售上海超滤浓缩管供应商。
操作模式 常规与切向流 : 常规溶液过滤(NFF)中液体在压力或真空驱动下直接流 过膜。大的颗粒物被膜截留并堆积在膜上,小分子则通过膜流出。NFF 常 用于无菌过滤、澄清预过滤及*** / 蛋白样品制备等。切向流过滤(TFF) 液体流过时与膜表面呈一定角度,被膜阻挡的大颗粒物不会累积在膜表 面,而且还会被切向流从膜表面扫除,因此 TFF 成为按分子大小不同分离 的主流方法。TFF 在大体积样品处理中是主要的操作方法,而现在,TFF 技术被用于 Amicon® Ultra 离心式超滤管的设计中,使小体积样品的浓缩 和分离操作也变得更加方便。
微滤中膜的孔径大小通常以微米计,表示大于这一规格的颗粒将被膜截留。超滤膜根据 NMWL分级,有时也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多数大于这个值的分子将在超滤时截留。一个确定NMWL的超滤膜应该截留至少90%以上的这个大小的球形分子。但为了保险起见,实践中选择的膜孔径要小于目的分子。缓冲液置换时膜截留分子量应该充分大于流过的溶质。当膜材料相同时,孔径减小 会增加排阻而减小滤过率。截留及产物回收的影响因素包括分子的形状、带电性质、样品浓度及组成成分、操作条件、使用的设备构造等。因此常常发生同样 NMWL 的膜对一定范围内的不同分子截留效果有一定差异的情况。使用超滤方法进行样品浓缩或除盐时,需要谨慎地选择合适的NMWL膜和设备。超滤浓缩管零售多少钱呢?
Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而精细,蛋白吸附损失基本上大概小。 如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少? 按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。 Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的,但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试,所以无法提供更进一步的参考信息。 Amicon® Ultra都是采用热封设计,不可以用高压高温灭菌。 不保证超滤管不包含RNA酶,建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时,以完全灭活RNA酶;残留的DEPC可以用Milli-Q®超纯水洗涤除去。上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好?黄浦区默克4ml超滤浓缩管销售
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特别推荐应用(提供实验报告作为参考) Microcon®超滤管: Microcon®PCR 级超滤管: • 法医鉴定分析的DNA样品制备 • 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换 • 体外合成mRNA的纯化 • 以人mRNA或总RNA制备荧光DNA探针 • 游离标记物的去除 • 纳克级核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 • 替代乙醇沉淀,离心法高效浓缩基因组DNA 应用指南 典型应用 肽及生长因子浓缩 蛋白浓缩与脱盐 电泳等操作前的蛋白样品浓缩 HPLC前去除蛋白 组织培养抽提物和细胞裂解液中大分子成分的纯化 生物样本浓缩(抗原,抗体,酶等) 从含有SDS(或无SDS)的缓冲液中浓缩gDNA 核酸浓缩与脱盐(单链或双链核酸) 去除标记核苷酸 去除标记氨基酸 从扩增的DNA产物中去除引物 克隆前去除连接序列(linker)江苏Merck超滤浓缩管咨询问价