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来源: 发布时间:2024年05月30日

外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体:300μg样品(相当于300μg总蛋白)用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释,与protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上(以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰),请参考默克磁珠操作说明书。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推荐使用试剂目录号信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准,相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心,用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题,真是惠而不费,不亦乐乎?上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好?无锡默克超滤浓缩管联系人

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核苷酸截留分子量(NCO) 超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的,适合各种蛋白研究,但在核酸 和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏 过,相对于球形蛋白需要更致密的膜(截留分子量更小)。所以选择 滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。 浓差极化 浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞,产生除了膜本身截留分 子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时,会形成相当于第二层滤膜作 用的胶体层,干扰分子通过滤膜,同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分 也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。无锡默克超滤浓缩管联系人上海超滤浓缩管哪家比较好?

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如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。 2)如果目的样本也不在滤过液中,那么: a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。

这种小管适合在1.5mL离心机中使用,其Ultracel®超滤膜对于蛋白及其它成分都表现出 极低的非特异性结合,连同医药级O型圈封闭设计,确保更少的样品丢失,更稳定的数据结果。诸多考虑周到的精细设计使Microcon®成为比较好用的样品制备工具之一。 特点与优点: 低吸附膜和反转回收设计,即使是小体积、低浓度样品得率也能达到95%以上 可以用产品自带的1.5mL样品收集管存储滤过液和浓缩产物 浓缩倍数可达100X 操作简便快捷,易于标准化。 Microcon® DNA Fast Flow 超滤管 专门设计用于从含有SDS的溶液中浓缩和回收基因组DNA。管子和膜均为低非特异性吸附的材质,医用级O型圈密封,保证了在洗涤步骤中样品丢失**少。反转回收设计,即使样品量很小也能获得理想的得率,浓缩倍数可以达到20X。上海超滤浓缩管销售公司电话多少?

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Minicon®浓缩器 Minicon® 浓缩器用于在电泳或免疫电泳分析前对尿液和脑脊液进行浓缩,以增强对不正常或病态的蛋白质(例如尿中的 Bence Jones 蛋白)的识别。B15型有 8 个浓缩单元,用于 5mL 样本的处理;CS15型有 10 个浓缩单元,适合 2.5mL 样品的处理。溶剂和盐分通过超滤被吸收剂吸收而样品被浓缩。 优点与应用 静态浓缩器,不需要其它辅助装置 浓缩倍数达到 100 倍,样品终体积小 同时浓缩多个临床样品 特别推荐用于尿液、脑脊液等的蛋白 富集分析超滤浓缩管咨询服务电话多少呢。浦东新区默克0.5ml超滤浓缩管报价

超滤浓缩管的系列有很多。无锡默克超滤浓缩管联系人

Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南 亲和纯化 用于纯化GST•Tag,His•Tag等重组表达蛋白及抗体,适合~0.5 mL裂解液操作 6次低速离心,总耗时~100分钟(含65分钟孵育时间) 1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。 1,000×g离心1 min。 2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。 3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。 4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。 外泌体用于细胞学或动物实验前的无菌处理 已经经过上述方法制备的外泌体在进行细胞或动物实验之前还需进行一步除菌过滤,这个时候考虑到得率,应该采用离心法处理,以减少过滤时的外泌体样品损失。 超滤方法纯化具体操作步骤举例 Amicon® Ultra-15 超滤管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip®真空抽滤对样品进行澄清[目录号SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]无锡默克超滤浓缩管联系人