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（白色）在润湿过程中溢出水提供的托盘。不要弄湿支撑层。放置湿的滚动板上的污点固定器。2.如果需要，将印迹预先在甲醇和水中浸湿，然后将其放置在印迹支架中心，蛋白质面朝下。注意：印迹不得超过材料中指定的尺寸必填部分。3.轻轻滚动印迹以去除气泡，然后稀释印迹保持并滚动一次。4.打开吸墨纸固定框架，用力将吸墨纸固定在蛋白质面朝上，然后将其放入框架中。一个缺口吸墨架可确保正确放置在框架中。注意：如果只在框架中运行一个MultiBlot，请放置孔空白卡在第二口井中。5.关闭并锁定框架。加上海Merck蛋白印记加速器WB实验加速器联系电话上海益启生物加速完成封闭到抗体孵育实验订购方便。

素膜上并与首先抗体共孵。首先抗体专一地与待分离蛋自质的抗原决定簇结合，然后用 另一种蛋自质，如 135I-蛋白 A 或辣根过氧化物酶连接的山羊抗 IgG 检测已结合上去的抗体。本法所需时间 6 小时 蛋白质的 PAM 凝胶电泳     几乎所有蛋白质电泳分析都在 PAM 凝胶上 进行，而所用条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并尽可能减少其相互间的聚集。比较常用的方法是将强阴离子去污剂 SDS 与某一还原剂并用，并通过加热使蛋 白质解离后再加样于电泳凝胶上。变性的多肽与 SDS 结合并因此而带负电荷，由于多肽结合 SDS 的量几乎总是与

【操作步骤】 按厂商的使用指南用两块干净的玻璃，平板和 0.75 mm 垫片组装电泳装置中的玻璃平板夹层，并固定在灌胶支架上。 按表 1 配制分离胶液体并脱气，然后加入 10％ 的 (NH4)2S2O8 和 TEMED，轻轻搅拌混匀。   按所需分离的蛋白质分子大小选择合适的 C3H5NO 百分比浓度，一般地，5％ 的凝胶可用于 60～200kDa 的 SDS 变性蛋白质分子的分离，10％ 用于 16～70kDa，15％ 用于 12～45kDa。 用一根巴斯德吸管立即将分离胶液体沿夹层中一条垫片的边缘加入于玻璃平板夹层中，离胶，并被筛分而依各自的大小得到分离。上海益启生物的联系电话。

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SDS PAM 凝胶电泳大多在不连续缓冲系统中进行，其电泳槽缓冲液的 pH 值与离子强度不同于配胶缓冲液，当两电极间 接通电流后，凝胶中形成移动界面，并带动加入凝胶的样品中所含的 SDS 多肽复合物向前推进。样品通过高度多孔性的积层胶后，复合物在分离胶表面聚集成一条 很薄的区带（或称积层）。曲于不连续缓冲系统具有把样品中的复合物全部浓缩于极小体积的能力，故比较大提高了 SDS PAM 凝胶的分辨率。 比较普遍 使用的不连续缓冲系统比较早是由 Ornsstein（1964）和 Davis（1964）设计的，样品和积层胶中含 Tris-Cl（金山区WB实验加速优化WB实验加速器参数

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