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IHC 是从根词immuno"（与在操作中所用的抗体有关）和"histo"（意思是"组织"）而得其名称。与之不同，免疫细胞化学（ICC）的根词是"cyto"（意思是"细胞"），是以培养或分离的细胞代替组织进行的。IHC和ICC广泛应用于基础研究，目的是了解生物标记物的分布和定位以及在生物组织或细胞中差异表达的蛋白。 在IHC/ICC中的主要步骤如下∶·样本制备·抗原修复· 抗体染色·抗体检测 成功的IHC实验取决于高质量抗体选择和合遇的实验浓度。每一种抗体都要根据实际的实验情况进行优化。即使是同一反应体系，针对不同的抗体适合的稀释浓度也是不同的。实验者可以以说明书上推荐的稀释倍数作为参考。 SNAPi.d.⑧2.0IHC加速器带来的主要改进·直观的设计，将封闭、洗涤、抗体孵育及标记等步骤结合起来· 不需要使用石蜡笔·抗体可以收集后继续使用 ·切片操作时间大幅减少，洗涤步骤耗时大幅减少，可同时操作多达24涨切片 Sigma抗体上海授权代理商。金山区标签抗体抗体批发

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非特异性条带 抗体（一抗或二抗）浓度过高 降低抗体浓度。 SDS可能引起对固定蛋白条带的非特 转膜后，振荡洗涤 异性结合 在操作过程中不使用SDS。 条带扩散 抗体（一抗或二抗）浓度过高 降低抗体浓度。 在凝胶上载入过多蛋白 减少蛋白上样量。 黑色印迹，白色条带， 抗体（一抗或二抗）浓度过高 减少抗体浓度，特别是HRP偶联的二抗。 或信号快速减少 免疫沉淀 采用抗体-抗原沉淀(又叫免疫沉淀(IP))的方法将特异性蛋白从细胞或组织裂解液中分离出来。

问题 可能的原因 处理方法 印迹上出现条纹 在凝胶的蛋白负荷过量。 准确测量蛋白浓度，载入较少的蛋白。 印迹有污染或模糊 凝胶平衡不当，或在实验过程中收缩 检查凝胶平衡时间。 采用丽春红S染色时， 转膜无效 转膜时，小心除去气泡。 印迹染色较差 确保在电转过程中因为温度过高而产生气泡或凝胶/膜变形 采用丽春红S染色时， 在转膜过程中蛋白没有转移 检查设备（转膜盒、盒盖、电源）。 印迹没有染色 检查在转膜过程中凝胶和膜的顺序是 确保膜位于凝胶的右侧。 否正确科研用抗体保证质量-益启生物公司。

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比较好将其保存于+4℃。抗体上的荧光素较易感光淬灭。因此，荧光结合抗体应在 深色瓶中避光保存。长期保存时，某些抗体溶液可能产生不溶的成分。沉淀物可通过10000 g快速离心去除。 抗体的应用与优化 在19世纪末期，人们认识到了特异性抗体-抗原相互作用的价值，进而多种免疫技术问世，其中大多数目前仍在应用。从分析血液成分的沉淀素试验，到高度特异性的染色质免疫沉淀技术，再到使用自动化成像流式细胞仪上进行的免疫染色实验，以抗体为基础的工具在生物学和生物医学研究中一直起着重要的作用。金山区标签抗体抗体批发

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