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Westem HRP基材。高背景分锁不足更改为不同的阻止解决方案。吸笔架不够湿组装前，先将吸墨纸架弄湿。阻塞解决方案可能有始终准备新鲜的0.5％脱脂/低脂干奶。降级的抗体浓度过高降低抗体的浓度。吸笔架朝上放置将印迹架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗涤不足进行至少4次每次30 mL的洗涤。添加清洗剂时，确保真空连续运行缓冲。整个系统电平不一致的信号确保系统在平坦的水平表面上。污点抗体不均匀补充封闭液和抗体稀释剂遍及整个表面0.1％Tween 20表面活性剂。吸墨纸架使用小量移液器（例如5毫升），慢慢散布整个印迹中的抗体。应用至少2.5 mL（用于MultBlot），5 mL（用于Mini blot）或10 mL（用于Midi印迹）抗体。抗体体积低没有抗体回收盘确保抗体中的孔，回收托盘algn杨浦区Merck细胞分析仪Merck仪器销售买细胞计数器就找益启生物。

15分钟。图4.扩展孵化（过夜）：SNAP i.d.8 2.0系统与标准免疫检测一种。 SNAP id.o 2.0蛋白检测b。标准系统Midi印迹免疫检测将A431细胞裂解液和大鼠肝裂解液（12至3 ug）转移至Immobilon9-P膜。两种印迹均用在TBST中制备的0.5％NFDM封闭。这SNAP i.d.c 2.0 Midi印迹被阻断20秒，标准印迹为分锁了1个小时。两种印迹均与相同稀释度的MAP激酶1/2（ErK1 / 2），但是，对于HRP偶联的二抗山羊抗兔（AP132P），将SNAP i.d.2.0印迹孵育10分钟在TBST中洗涤3次后，将标准印迹孵育1小时。 图5.扩展孵化（1小时）：，SNAP i.d.o 2.0系统1小时协议与SNAP i.d.9 2.0系统标准协议与标准免

用SNAP i.d.o 2.0系统 系统设置 1.将SNAP i.d.9 2.0底座放在水平工作台上。2.通过推动管道末端的联接插件，将真空管道连接至系统背面。插入系统基座背面的快速断开接头，直至其滑动。注意：要断开管路连接，请用食指将管路连接器下方的卡舌向上推，然后将其拉出。管出来。3.将管道的另一端连接到真空源。使用一升的真空烧瓶作为疏水阀和一个Millex-FA。过滤器（目录号SLFA05010）可保护真空源不受污染，如下所示。注意：任何可以产生410毫巴（12 inHg）和34 L / min的真空源就足够了。如果是真空如果源的工作温度高于410毫巴，则SNAP i.d.2.0系统将自动调节真空度压力。如果真空源不足，则流经系统的流量可能会不一致，从而导致更长的时间。处理时间和/或抗上海益启生物的样本制备仪询价公司电话。

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测 注意：所有抗体均使用0.5％NFDM作为封闭剂和Luminata™Forte Western HRP进行测试作为化学发光试剂的底物。 印迹阻止 •SNAPi.d.®2.0系统与比较常用的封闭剂兼容，包括脱脂/低脂干燥牛奶，牛血清白蛋白（BSA）和酪蛋白。许多其他市售阻滞剂也兼容（请参阅表5）。•为了确保比较佳的墨量通过吸墨架，必须完全封闭封闭液溶解且不含所有颗粒物质。在某些情况下，可能有必要降低封闭剂以达到所需的流量。•不建议使用浓度高于0.5％的脱脂/低脂干奶。•封闭剂应在含有0.1％Tween®20的tris或磷酸盐缓冲盐溶液中制备表面活性剂，以降低表面张力并确保封闭剂在印迹架上均匀分布表面。•为确保抗体在孵育步骤中均匀分布，请在封闭液中稀释抗体，包含Tween®20表面活性剂。 如何使长宁区Merck仪器联系方式

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