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小时。两种印迹均与相同稀释度的MAP激酶1/2(ErK1/2),但是,对于HRP偶联的二抗山羊抗兔(AP132P),将SNAPi.d.2.0印迹孵育10分钟在TBST中洗涤3次后,将标准印迹孵育1小时。 图5.扩展孵化(1小时):,SNAPi.d.o2.0系统1小时协议与SNAPi.d.92.0系统标准协议与标准免疫检测对照,茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液(10-0.63ug)被转移到Immobilon8-P膜上。印迹被阻止补充有0.5%脱脂奶粉(NF两种印迹均用在TBST中制备的0.5%NFDM封闭。这SNAPi.d.c2.0Midi印迹被阻断20秒,标准印迹为关闭了1个
temHRP基材。高背景关闭不足更改为不同的阻止解决方案。吸笔架不够湿组装前,先将吸墨纸架弄湿。阻塞解决方案可能有始终准备新鲜的0.5%脱脂/低脂干奶。降级的抗体浓度过高降低抗体的浓度。吸笔架朝上放置将印迹架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗涤不足进行至少4次每次30mL的洗涤。添加清洗剂时,确保真空连续运行缓冲。整个系统电平不一致的信号确保系统在平坦的水平表面上。污点抗体不均匀补充封闭液和抗体稀释剂遍及整个表面0.1%Tween20表面活性剂。吸墨纸架使用小量移液器(例如5毫WB实验加速器可用于加速可回收抗体实验。
2.0系统中对遵循标准协议的系统进行重新探测。●如果不需要剥离(例如,如果使用其他二抗进行检测),则可以重新检测印迹快速清洗后,立即在SNAPi.d.92.0系统中使用。 优化准则抗体已经开发了优化指南,以使用户能够转换所用抗体的浓度将标准免疫检测测定法浓缩至适用于SNAPi.d.@2.0系统的浓度。大多数用户会能够使用相同量的抗体,但与标准品相比,体积更小,浓度更高免疫检测。但是,当使用扩展抗体方案(第12页)时,可以使用相同的方法通常用于标准免疫检测的一抗的浓度,体积和时WB实验加速器的直销公司。奉贤区同时操作4个WB实验加速WB实验加速器商家
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