脑类器官作为模拟大脑发育、神经疾病以及脑肿瘤微环境的核心体外模型,在神经科学、肿瘤研究领域发挥着不可替代的作用。但传统孔板、轨道振荡悬浮培养模式,长期面临通量低、大小不均、易凋亡、传代频繁、重复性差等痛点,极大限制了实验稳定性与规模化研究推进。
德国 OMNI Life Science 的CERO 3D 生物反应器,为 3D 类器官培养带来全新解决方案。Sevenich LAB 团队***将该系统应用于小鼠成年神经干细胞(aNSCs)、脑类器官以及胶质瘤脑癌组装体的构建,和传统 6 孔悬浮板、96 孔 ULA 板开展对照实验,在可扩展性、生长动力学、长期培养稳定性三大维度交出亮眼数据? 小鼠 aNSCs 与脑类器官培养:性能数据***升级相较于传统 6 孔悬浮振荡培养,CERO 生物反应器交出亮眼实验数据:
1. 超高可扩展性 单管最高可容纳 5000 万细胞,单管可培养 200 个以上脑类器官,单位面积类器官产出数量提升15 倍;持续运动模式有效避免类器官互相融合,摆脱孔板空间束缚,非常适合规模化模型制备。
2. 生长动态可控,降低人工干预 初始神经球 5 天形成,生长速度平缓可控,结块现象显著减少;传代频率降低 24 倍;培养基更换频次下降,人工操作减少 50%,大幅解放科研人力,降低人为操作带来的批间差异。
3. 超长周期稳定培养 传统悬浮板培***类器官,培养至 3 个月就出现尺寸不均、椭圆形态、凋亡坏死核心。而 CERO 体系下脑类器官可稳定培养超过 5 个月,形态圆润、尺寸分布均一可达 2 mm,组织核心持续保持增殖活性,无需频繁更新基质,培养时长较传统方法延长 1.6 倍,完美适配需要长时间观察神经发育的实验设计。
对照现象:
✘传统 6 孔悬浮振荡板:>800 μm 类器官容易挤压变形,呈甜甜圈形态,沉降孔底营养获取不均
✔CERO 生物反应器:全程稳定悬浮,规避底板接触,营养物质充分交换,类器官生长高度均一。? 脑癌组装体:构建更贴近临床的肿瘤微环境共培养模型脑类器官胶质瘤球体共培***聚集体)是符合 3R 原则的前沿体外模型,可以同时模拟正常脑组织与肿瘤病理状态。 传统 96 孔 ULA 板的短板十分突出:类器官与胶质瘤球体互相接触表面积不足 10%,肿瘤和健康组织交互程度弱,Ki67 显示增殖活性下降,Cas3 凋亡染色提示组织凋亡水平偏高,很难复刻临床上肿瘤被脑组织包绕的真实病理场景,不利于开展脑肿瘤侵袭、药物筛选研究。
借助 CERO 生物反应器,该瓶颈被成功突破:
✅ 接触面突破 50%:显著提升胶质瘤球体和脑类器官融合面积,H&E 染色可见脑类器官组织向肿瘤外侧侵袭生长,高度还原体内肿瘤脑组织互作微环境;
✅ 增殖活性维持、凋亡显著下降:Ki67 证实肿瘤与正常神经组织均保持良好增殖能力,Cas3 凋亡信号显著降低;
✅ 单管可同时培养多个组装体,支持复杂模型的长期共培养,提升实验可靠性,为脑肿瘤机制、药物评价提供高质量体外工具。
实验流程简述: 预分化脑类器官与 GL261 胶质瘤球体预先制备,先在 96 孔 ULA 板共孵育 72 h 形成初步连接;将一半组装体转移至 CERO 管继续培养 48 h,另一半留在 ULA 板做对照;累计 120 h 后固定切片,开展 H&E、Ki67 增殖、Cas3 凋亡染色分析对比两组差异。
?核心优势对比(CERO vs 传统培养方法)
? CERO 核心价值总结?规模化:细胞、类器官高通量制备,适配药物筛选、大批量样本需求;
?标准化:降低人工干预,减少批间差,落实 3R 替代减少优化理念;
?长周期:支持数月级别脑类器官、肿瘤组装体稳定培养;
?病理还原:肿瘤类器官共培养融合效率大幅提升,模拟真实肿瘤微环境;
?省人力:减少换液、传代频次,降低污染风险与实验成本。
Sevenich LAB 评价:“CERO 生物反应器显著提升了我们的生产效率,减少了人工操作时间,并为研究开辟了令人振奋的新途径。” 团队后续还将基于该系统拓展脑切片培养相关联合研究。
?写在最后可重复、可规模化的 3D 培养系统,是当前类器官领域迫切的需求。CERO 生物反应器不只是简单替代传统摇板,而是从流体悬浮、营养交换、生长调控层面,解决类器官大小不均、早期凋亡、融合畸形等老大难问题,既适用于神经干细胞、脑类器官基础研究,也支撑脑肿瘤组装体等复杂病理模型构建,拓展神经科学与肿瘤体外建模的研究边界。
CERO 3D 生物反应器(OMNI Life Science/OLS)国内总代理为上海迹亚国际商贸有限公司(Gaia China),可为国内科研院所、药企提供设备咨询、技术培训、售后等全套支持服务。