标准菌株在微生物实验室不确定度评定中如何应用？

测量不确定度是表征赋予被测量值分散性的非负参数，它定量说明了测量结果的质量和可信程度。在微生物检测中，由于检测过程涉及诸多生物变量，不确定度评定相对复杂，但标准菌株在其中扮演着量化这些不确定度来源的关键角色。不确定度评定通常遵循“因果图法”或“分步计算法”，需要识别并量化检测过程中的各种不确定度分量，然后将它们合成为扩展不确定度。标准菌株可以用来评估以下几个主要的分量：个分量是称量或稀释过程引入的不确定度。通过使用标准菌株制备已知浓度的菌悬液，并让不同操作者、在不同时间，用不同的移液器和稀释液进行反复稀释和涂布，记录菌落计数结果。对这些大量数据进行统计分析，就可以量化出稀释操作和移液器校准等因素带来的不确定度。第二个分量是菌落计数引入的不确定度。微生物检测终结果的得出，依赖于平板上菌落计数的准确性和重复性。通过使用标准菌株制备一系列浓度均匀的平板，让多名经验丰富的实验员对同一批平板进行反复计数，或者同一实验员在不同时间对同一批平板进行多次计数，然后统计计数值的分散性，就可以评估出菌落计数这一步骤带来的不确定度。第三个分量是培养基性能的批间差异引入的不确定度。不同批次的培养基，尽管都通过了出厂检验，但其营养水平、抑制强度可能存在微小差异，这会影响微生物的生长速度和菌落形态，终影响计数结果。通过使用标准菌株，在多个批次（如5-10批）的同类型培养基上进行生长率或回收率测试，计算这些批次间回收率的变异，就可以将培养基的批间差异作为不确定度的一个分量进行量化。第四，人员操作的变异也是重要的不确定度来源。通过组织人员比对试验，让不同操作者使用同一批标准菌株和试剂，对同一份样品进行完整的检测流程，然后统计分析各人结果的差异，可以评估出人员操作这一分量对总不确定度的贡献。南京乐诊提供的不确定度评定用标准菌株，每支浓度都经过精确标定，并附有不确定度值，可以帮助实验室按照ISO 17025的要求，建立起科学的测量不确定度评定程序，使检测结果更加完整、可靠。