H&E染色返蓝效果不稳？可能是忽略了返蓝液原理

  在日常病理工作中，是否常遇到H&E染色后细胞核发红、背景泛灰，或同一蜡块不同切片染色深浅不一?技术员反复调整流程，却始终难以稳定输出高质量图像。问题往往不在于苏木素或伊红试剂，而在于H&E染色返蓝。这个步骤看似简单，实则直接决定诊断图像的可靠性。

  1.H&E染色返蓝：不只是“变蓝”，更是诊断清晰度的基石

  在标准H&E染色流程中，组织经苏木素染色和酸性分化后，细胞核呈红紫色。

  此时必须通过返蓝步骤，使其转化为稳定的蓝色，才能与粉红色的胞质形成鲜明对比。

• 若H&E染色返蓝不充分，核染色浅淡，易漏诊早期异型;
• 若返蓝过度，则背景泛蓝，掩盖细胞边界。

  尤其在乳腺、淋巴、胃肠道等对核细节高度敏感的病理类型中，返蓝质量直接影响初筛判断的准确性。

  2.返蓝液原理：一场由pH驱动的分子结构转变

  理解返蓝液原理，是解决染色不稳定的关键。

  苏木素-金属复合物(如铝-苏木素)在酸性环境中呈红紫色，需在弱碱性条件下(通常pH7.5–9.0)发生结构重排，形成稳定的蓝色醌式结构。

  传统的“自来水冲洗”依赖水中微量碳酸盐实现返蓝，但水质pH波动大、离子成分不可控，导致反应不可重复。

  而病理染色试剂中的返蓝液(如含碳酸锂配方)，能提供稳定、可预测的碱性环境，确保每张切片获得一致的显色效果。

  3.为什么通用方法失效?因为变量太多，经验难靠

  许多实验室仍沿用经验式操作：“冲到变蓝为止”。

  然而，组织致密度、染液批次、室温、水硬度等因素都会干扰H&E染色返蓝效果。

  在自动化染色平台普及的现在，这种非标操作更易造成批次差异。一张“花片”不只浪费人力与耗材，还可能延误报告出具，甚至引发临床质疑。

  4.稳定的病理染色试剂，才是效率与质量的保障

  选择经过验证的病理染色试剂，本质是为实验室建立可重复的技术基线。

  以南京鼎泰医疗用品有限公司的返蓝染色液为例，采用高纯碳酸锂与超纯水配制，pH缓冲能力强，无沉淀、兼容主流自动染色机，开瓶即用，有效期长达18个月。

  产品已通过ISO13485认证，并拥有相关实用新型专利(如ZL202122050056.6)，服务于全国众多病理科，帮助技术团队从“调颜色”转向“保质量”。

  5.回归本质：精确病理，始于对返蓝液原理的尊重

  当AI辅助诊断、数字病理成为趋势，原始图像质量的重要性反而更加凸显。

  而这一切，都建立在包括H&E染色返蓝在内的基础步骤之上。深入理解返蓝液原理，选用可靠的病理染色试剂，不是追求“更好”，而是守住“可靠”——让每一张切片都能真实、清晰地呈现组织语言，为病理医生提供值得信赖的判读依据。