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使用研磨仪、研磨棒或者使用超声破碎细胞的方法破碎细胞,加入去污剂,如sds等,除去膜脂。去除细胞内的蛋白质,包括与DNA结合的组蛋白,通过加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提等方法去除。加入RNA酶去除RNA,如实验不严密,可省略此步。沉淀DNA,需在冷乙醇或异丙醇中沉淀,放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上,原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。总结:DNA提取方法有下面⑦种一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。四.异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)五.表面活性剂快速制备法:用TritonX-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。六.加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。七.碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和。
3505C植绒拭子(法医专用)*一代DNA样品采集工具,尤其适用于接触DNA、微量DNA物证采集,获多国。意大利华晨阳公司生产的4N6FLOQSwabsTM植绒拭子已在中国、美国、欧洲、日本等多个国家和地区获得了技术,专门为犯罪现场采集口腔细胞、唾液、精液、血斑、皮屑等检材设计,尤其适用于微量DNA的采集。4N6FLOQSwabsTM植绒拭子采用技术的尼龙纤维植绒填充技术,其顶部为垂直于基底的尼龙纤维结构,这种结构可*限度的提高DNA采集和洗脱效率。传统的棉签/纤维拭子在采样时,样本会被其纤维团分散且滞留在纤维中,而4N6FLOQSwabsTM植绒拭子采样时,全部的样本都会被保存至尼龙纤维的近表面处,以保证快速且完全的洗脱和释放。适用范围:适用于法医、*机关DNA实验室人员和基层*系统现场勘查人员及司法鉴定机构使用。经瑞捷(RapidHIT)DNA快速检测仪测试,对接触DNA的检出率华晨阳植绒拭子的效果明显优于传统棉签。3505C植绒拭子(法医专用)产品特点采用的尼龙植绒技术,样本吸收更加快速新颖的折点设计,让拭子轻松折断并进入管中,更加便于操作*限度的样本洗脱及转移,对微量DNA样本采集尤为出色经过***剂的特殊处理,防止微生物污染GMP标准生产,封闭式包装,无菌、无酶、无***剂。致使原本含量不高的DNA析出效率更低,甚至可引起测试的假阴性结果。
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植绒拭子使用无抵抗DNA扩增材料制成,经过可以直接PCR扩增的验证,省去提取步骤。贵州核酸检测植绒拭子供应商家
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