本发明涉及一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。背景技术:近年来,随着荧光PCR技术的不断成熟。该技术在科研及检验领域得到了应用,成为分子生物学领域不可或缺的一项重要技术。在进行遗传背景分析过程中,血液、唾液和口腔拭子成为重要的生物分析样本。但是,由于血液、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反应物,例如血液中含有血红素,蛋白质,脂肪,抗凝剂等,唾液和口腔拭子含有蛋白质,脂肪,抗凝剂等,使得用血液、唾液和口腔拭子直接进行荧光PCR反应变得尤为困难。因此,现在临床上往往先要从血液、唾液和口腔拭子样本中纯化出DNA,才能进行样本的DNA扩增。提取血液、唾液和口腔拭子基因组的方法种类非常多,传统酚氯仿抽提法,高盐盐析法,模离心柱吸附法,磁珠法,等等。经典的血液核酸提取方法包括几个过程。1.通过低渗液涨破红细胞,将血红素物质释放出来,然后离心,清洗去除血红素。2.通过裂解液裂解白细胞,释放核酸物质。3.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质,去除其他杂质。4.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。5.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。 口腔拭子是由手柄、连接杆和采样头组成。广东医疗口腔拭子批发厂
基因采样套装用途:基因检测,分子诊断,DNA采集,细胞学,基因检测采样,**基因,遗传学,公安DNA系统基因身份证,基因密码,疾病筛查分析研...查看全文全外显子基因突变检测采样盒全外显子基因突变检测采样盒,是贝瑞和康推出的一款便携式口腔脱落细胞采样盒,用于与乳腺AI、卵巢AI等发生密切相关的BRCA1/2基因突变检测的前期取样过程。该采样盒内置两套口腔拭子,口腔拭子采用自封袋单独包
检测口腔拭子采样流程指南口腔拭子采样方法(口腔脱落细胞)取样是简单、无痛、无创的DNA标本采集方法。
该方法适用于采集任何年龄段人群的DNA样本。 上海核酸口腔拭子厂家然后用完的废弃掉的拭子请按照您所在地区法例进行处理。
下面将结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种可用于荧光PCR扩增的快速提取全血基因组的方法中的荧光PCR扩增反应液包括浓度或含量和组分如表1。将所述的荧光PCR扩增反应液对血液样本中的管家基因***DH进行荧光PCR扩增,方法如下:将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸释放剂,涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀;然后再加入200μL核酸释放剂,涡旋1min至沉淀完全散开,5000g离心30s,弃上清;向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的血液基因组DNA;取上清液3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。所述的荧光PCR扩增程序如下。步骤①:50℃,2min,循环1次。步骤②:95℃,5min,循环1次。步骤③:95℃15s,55℃30s(收集荧光),循环40次。结果分析:平行扩增的荧光定量PCR反应中,阴性对照无扩增,说明反应体系正常,无污染。用本发明处理了10份来源不同的人血液样本,然后用人管家基因***DH引物进行荧光PCR扩增检测,结果如图1所示。
本发明的特征在于:应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测,主要步骤如下。(1)将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至,加入200μL的核酸释放剂,涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀。(2)将步骤(1)中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,至沉淀完全散开,然后5000g离心30s,弃上清。(口腔拭子样本则无需进行此步骤)。(3)向步骤(2)所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1~2min;室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的基因组DNA;所述的核酸释放剂组成为20mM~80mM的氢氧化钠溶液、~、~、~、~***钠、~3%甲酰胺;所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2~图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。这款口腔拭子用起来超级便捷:**一体化设计,更容易操作。
1根微细型鼻咽植绒拭子50支/盒6盒/箱货号产品名称规格902CSRK涂抹棒取样盒(配有1个SRK稀释液10ml的自立管、1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子)25支/盒902C2SRK涂抹棒取样盒(配有1个SRK稀释液10ml的自立管、1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子)250支/箱905CSRK涂抹棒取样盒(配有培养基自立管、涂抹棒粘胶纤维拭子、取样模具10*10cm各1个)10套/盒908CSRK涂抹棒取样盒(配有1个SRK稀释液、1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子)25支/盒167KS01塑料单独包装(1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子)1000支/箱155C管装单独包装(1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子)1000支/箱922CSRK取样运送管(配有10ml稀释液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子,独立包装于无菌袋里)1支/包926CSRK取样运送管(配有10ml稀释液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子)50支/盒929CSRK取样试剂盒(配有letheen肉汤培养基、适用于petrifilm纸片平板计数)50支/盒947CSRK取样运送管(配有4ml通用中和液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子)50支/盒947C2SRK取样运送管(配有4ml通用中和液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子)300支/箱938CSRK471取样盒(每小袋配有10ml稀释液、8个管装塑料涂抹棒聚酯纤维拭子)25支/盒954CSRKPHARMA,塑料涂抹棒。口腔拭子在使用时要握住手柄,将拭子伸进口腔用刷牙的力度同时旋转拭子,让拭子头部充分接触口腔粘膜。上海核酸口腔拭子厂家
这款口腔拭子是大包装盒的,而且大包装盒内每套独立包装,方便使用。广东医疗口腔拭子批发厂
具体步骤如下:1,提**0分钟先用清水漱口(不用牙膏,尤其是母乳的婴儿需要喝几口清水,也不用漱口水);2、在信封上用笔作好标记(比如:父亲、母亲或孩子)和采集日期,姓名.3、一手持华晨阳基因采样棉签,伸进口腔左(右)内侧颊粘膜处稍用力反复擦拭15-20下(边擦拭边转动基因采样棉签),取出基因采样棉签,放在信封或者白纸上、阴干十多分钟待口水完全干掉;(擦拭的具**置是腮边或者说脸颊腮帮子内部——打个比方,大人捏孩子脸蛋的那个位置,从口腔里擦拭)4、同样的方法采集第二根棉签(另一侧),每个人一侧各提取三根(共六根)基因采样棉签;5、阴干后的基因采样采集棉签分别装入已做好标记的信封中密封(请不要用胶袋或者保鲜膜装采样棉签)。6,将取好的样本尽早拿到实验室做PCR实验,您也可以选择邮寄到实验室或者医院7,我公司接收样本、签定DNA委托申请表(代合同)、付款事宜、10个工作日出结果。取好的基因采样拭子棉签样本请不要自行保管超过一个星期,尽早快递到我们实验室以确保样本不受污染。特殊样本的取样操作方法请咨询客服(比如在对方不知情的情况下或者取孩子样本需要高度保密的情况)。广东医疗口腔拭子批发厂
深圳市华晨阳科技有限公司是一家致力于核酸检测、分子诊断、医学检验、病毒检测等产品研发、生产、销售于一体的国家高新技术企业。公司拥有二十多项**,部分专利已经转化应用于市场。产品主要应用于基因检测、医疗机构、生物制药、大型甲等医院、出入境检验检疫、诊断试剂、疾控机构、刑侦法医鉴定等。近年来,公司不断加大自主研发投入,积极引进人才和技术,并与国内外多家科研机构、医学检验所以及三甲医院、基因检测公司、疾病预防控制中心等科研机构有着紧密合作,促进人类健康产业大发展。