对铜绿假单胞杆菌的复苏,要先准备一个茶缸或1000毫升的烧坏,内装2/3杯37摄氏度的温水。从液氮中取出冻存管、迅速置于温水中并不断搅动。使冻存管中的冻存物在1分钟之内融化。打开冻存管,将细胞悬液吸到离心管中。1000rpm离心10分钟,弃去上清液。沉淀加10毫升培养液,吹打均匀,再离心10分钟,弃上清液。加适当培养基后将细胞转移至培养瓶中,37摄氏度培养,第二天观察生长情况。器材通常为液氮罐、冻存管(塑料螺口冻存管或安瓿瓶)、离心管、吸管、离心机等。试剂通常为0.25%胰酶、培养基、含保护剂的培养基(即冻存液)。冻存液配制是培养基加入甘油或DSMO,使其终浓度达5—20%。保护剂的种类和用量视不同细胞而不同。配好后4摄氏度下保存。金黄色葡萄球菌落表面光滑,颜色为无色或者金黄色,无扩展生长特点。金黄色链霉菌
金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)也称“金葡菌”,隶属于葡萄球菌属,是革兰氏阳性菌表示,为一种常见的食源性致病微生物。该菌较适宜生长温度为37℃,pH为7.4,耐高盐,可在盐浓度接近10%的环境中生长。金黄色葡萄球菌常寄生于人和动物的皮肤、鼻腔、咽喉、肠胃、痈、化脓疮口中,空气、污水等环境中也无处不在。金黄色葡萄球菌是常见的食源性致病菌,普遍存在于自然环境中。金黄色葡萄球菌在适当的条件下,能够产生肠有害元素,引起食物中毒。近几年,金黄色葡萄球菌引发的食物中毒报道层出不穷,由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右,金黄色葡萄球菌成为只次于沙门氏菌和副溶血杆菌的第三大微生物致病菌。韦司梅拟盘多毛孢菌种枯草芽孢杆菌可以很好的刺激水产动物免疫组织的发育,增强机体免疫的能力。
金黄色葡萄球菌的检验方法操作步骤:直接计数方法6.2.1吸取上述1:10混悬液,进行10倍递次稀释,根据样品污染情况,选择不同浓度的稀释液1mL,分别加人三块Baird一Parker平板,每个平板接种量分别为0.3mL、0.3mL、0.4mL,然后用灭菌L棒涂布整个平板。如水分多不易吸收,可将平板放在36℃士1℃lh,等水分蒸发后反转平皿置36℃士1℃培养。在三个平板上点数周围有混浊带的黑色菌落,并从中任选五个菌落,分别接种血平板,36℃士1℃24h培养后进行染色镜检、血浆凝固酶试验,步骤同增菌培养法。
大肠埃希氏菌(Escherichiacoli,E、coli),又称大肠杆菌,是肠杆菌科(Enterobacteriaceae)、埃希氏菌属(Escherichia)的表示菌。因Escherich在1885年发现而得名,因其具有结构简单、需要的营养物质简单、易于培养、繁殖速度快、分布广等特点,无论在科学试验研究中,还是在食品安全和相关疾病研究中,常作为载体菌、指示菌、病原菌备受广大科研工作者的关注。如何快速检测样品中的大肠杆菌是研究者几十年来一直亟待解决的问题,特别是大肠杆菌生长过程中的形态、染色特性等基本内容。试验通过革兰氏染色的方法,对培养8~24h大肠杆菌的形态特征进行研究,对今后更好地控制和利用大肠杆菌,具有指导意义和参考价值。枯草芽孢杆菌可使水产类动物对饲料的吸收利用更加充分。
通常,铜绿假单胞杆菌温度太高,有时会得不到扩增产物;铜绿假单胞杆菌温度太低时,容易发生非特异性反应。另外,时间太短时,会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成。传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6摄氏度冰箱内保存。液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。铜绿假单胞菌生长对营养要求不高。热丁香类诺卡氏菌
金黄色葡萄球对高温有一定的耐受能力,在80℃以上的高温环境下30min才可以将其彻底杀死。金黄色链霉菌
如何清理食品中金黄色葡萄球菌?我国对金黄色葡萄球菌限量有明确规定,2013年我国制定并颁布了第1部通用的食品微生物安全的国家标准《食物中致病菌限量》(GB29921-2013),其中对乳制品、肉制品、水产制品、粮食制品、即食豆类制品、即食果蔬制品、饮料、冷冻饮品、即食调味品以及婴幼儿配方食品等十几大类食品分别规定了金黄色葡萄球菌的限量要求。金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品:食品加工人员、或销售人员带菌,造成食品污染,食品在加工前本身带菌,或在加工过程中受到了污染,产生了肠有害元素,引起食物中毒,熟食制品包装不密封,运输过程中受到污染,禽畜局部化脓时,对肉体其他部位的污染。金黄色链霉菌
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