分光光度计是实验室检测核酸或者蛋白样品浓度*常用的工具之一。仪器使用频繁,但甚少见到有人维护。其实,保持分光光度计清洁、无污染是成功操作的关键。仪器注意事项1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。分光光度计的关键参数有哪些选择可见和紫外可见的分光光度计所关注的*关键的指标有三点:一是波长范围,二是波长准确度,三是杂散光参数。波长范围的选择是由用户实验需要所定,波长范围越宽的价格越贵;波长准确度及杂散光参数的数值越低,表示性能越好。影响显色反应的主要因素(1)显色剂用量:通过实验来确定*适用量;(2)反应液的酸碱度(pH)溶液酸碱度直接影响金属离子与显色剂存在形式以及有色化合物组成的稳定性;。选购分光光度计时需要能够考虑到波长的可检测范围!北京火焰分光分光光度计操作
一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780nm至3,000nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380nm到800nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管和光敏二极管。陕西uv分光光度计使用分光光度计有一定的准确度和精确度。
紫外可见分光光度计的原理:物质的吸收光谱本质上是物质中的分子和原子吸收了光中的光波能量,相应地发生了分子振动级跃迁和电子能级跃迁的结果,由于各种物质具有不同的分子原子和分子结构,所以在吸收光能量的情况也各不相同,仪器通过各种物质特有的吸光光谱的曲线,来判定被检测物质的含量,这就是紫外可见分光光度计定性和定量的基础,紫外可见分光光度计就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分,结构。红外分光光度计的原理:由光源发出的光,被分为能量相同的两束光线,其中一束通过样品,另外一束作为参考光作为参照基准。这两束光通过样品进入红外分光光度计后,被扇形镜以一定的频率调制,形成交变信号,两束光合为一束。
PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。用小试管cuvette装样品容量一般从1μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品的固定物来满足各种改变需要。任何紫外可见分光光度计,必须要有相应的光电转换系统。
并更换干燥剂。d.电路故障。解决方法:检修电路。2、仪器不能调“100%”。可能原因:a.光能量不够。解决方法:增加灵敏度倍率档位,或更换光源灯(尽管灯还亮)。b.比色皿架未落位。解决方法:调整比色皿架使其落位。c.光电转换部分老化。解决方法:更换部件。d.电路故障。解决方法:调修电路。3、测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因:a.比色皿在比色皿架中放置的位置不一致,或其表面有液滴。解决方法:用擦镜纸擦干净比色皿表面,然后将其安放在比色槽的左边,上面用定位夹定位。b.电路故障(电压、光电接收、放大电路)。解决方法:送修。4、数显不稳。可能原因:a.预热时间不够。解决方法:延长预热时间至30分钟左右(部分仪器由于老化等原因,长时间处于工作状态时,也会工作不稳)。b.光电管内的干燥剂失效,使微电流放大器受潮。解决方法:烘烤电路,并更换或烘烤干燥剂。c.环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法:改善工作环境。d.光电管、电路等其它原因。小结综上所述,以下几个问题应引起仪器操作人员注意:1、比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。有些使用者对这个问题不够重视,因操作不当造成偶然误差,严重影响分析结果。为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管和光敏二极管。安徽分光分光光度计
超微量分光光度计不需要预热,可随时检测,检测时间短.北京火焰分光分光光度计操作
它还通过测定紫外光谱范围内强度峰值位置的精确度来确定波长的系统及随机误差。遵照这些建议来维护分光光度计,那么在今后的使用过程中再也不用担心测量结果有问题啦。分光光度法始于牛顿(Newton)。早在1665年牛顿作了一介罈人的实验:他让太阳光透过暗室窗上的小圆孔,在室内形成很细的太阳光束,该光束经棱镜色散后,在墙壁上呈现红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫的色带。这色带就称为“光谱”。顿通过这个实验;揭示了太阳光是复合光的事实。北京火焰分光分光光度计操作