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新疆免疫组化推荐

来源: 发布时间:2021年10月21日

免疫组化染色切片的好坏直接影响着病理医生对其染色结果的判断,进而影响病理诊断,所以制作一张良好的免疫组化切片至关重要,它需要病理医生与病理技师两者间的相互协调,密切配合和共同努力,病理医生选择抗体,设置对照,判读结果,指导技术;而技术人员进行实验操作,保证染色质量。在免疫组化切片的制作过程存在多个环节,每一环节的失误都可能影响检测结果,如抗原保存,蛋白酶消化,增强技术及对抗体的管理、使用和试剂的浓度等等,因此制作一张高质量的免疫组织化学切片是多方面相互配合的结果。做好免疫组化,你需要了解这些!新疆免疫组化推荐

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免疫组化如何比较大限度地降低组织非特异性染色? 

(1)缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是重要的一条。

(2)一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色,建议试用单克隆抗体看看。

(3)内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高(含血细胞多的组织),需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色; 

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(4)非特异性组分与抗体结合,这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果; 

(5)缩短DAB孵育时间或降低DAB浓度/过氧化氢浓度等; 

(6)适当增加PBS冲洗次数和浸洗时间,在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤为重要; 

(7)防止标本染色过程中出现干片,这容易增强非特异性着色。 浙江靠谱免疫组化哪家好免疫组化的样本保存要求是什么?

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免疫组化实验所用的抗体

免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。

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免疫组化常用的染色方法

根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法常用。

在临床应用中,免疫组化还可以进一步分类不同qi官与组织交界处cancer。由于重叠的特征,在一些组织qi官交界处的cancer,只凭组织学基础对cancer进行分类很困难。如胃肠道梭形细胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是间质起源的胃肠道间质瘤(GIST),还是神经起源的神经鞘瘤;同样发生于组织交界处的cancer有睾丸胚胎cancer与精原细胞cancer,两者较难区别,且医疗与预后明显的不同,但用免疫组化检测角蛋白就较易于区别:角蛋白阴性则为精原细胞cancer,而角蛋白阳性则为胚胎cancer。免疫组化检测多少钱?

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免疫组化实验所用的组织和细胞标本是什么样的?

实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本**常用、**基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中优先的组织标本制作方法。

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免疫组化技术的原理、分类和优点!新疆免疫组化推荐

关于免疫组化的封闭:用和二抗来源一致的血清在保湿盒中于37℃孵育15~30min,然后甩去封闭用血清,勿洗;注意:封闭时间根据具体实验调整;封闭液一般选用5%BSA或与二抗来源一致的血清,切记是BSA,不是PBS.很多论坛写的是PBS,太坑了。①使用血清好还是BSA好?答:***是待检样本会非特异性的和蛋白结合,从而导致背景过高,因此可以用BSA或血清封闭掉这部分非特异性的结合,从这点看,BSA和血清没有明显区别。第二是待检样本中可能会有Fc受体,可以和抗体恒定区结合,与抗体特异性无关,封闭血清中有抗体,因此用血清可以封闭掉一抗及二抗和样本Fc受体之间结合。BSA则无法封闭Fc受体。新疆免疫组化推荐

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