HEPES使用方法有两种:(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH调pH至7.2,滤过除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10mmol/L。(2)亦可配成100x贮存液(lmol/L),使用前取99ml培养液加入lml贮存液,**终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES贮存液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。需要注意的是,HEPES缓冲液的使用终浓度为10-50mmol/L,对细胞无毒性作用。一般情况下,浓度为20mmol/L的HEPES即可达到缓冲能力。现在市售HEPES为约10g包装的小瓶,大家根据实际情况正确灵活配制就OK了AVT注射用HEPES已登记!山西7365-45-9HEPES需求
HEPESBuffer(1M,7.5pH)PreparationandRecipeHEPESbufferisoneoftheGood'szwitterionicbufferwithapHrangeof6.8-8.2.ItiscommonlyusedincellculturemediumasitspHiswellmaintainedwithchangesincarbondioxideconcentration.ToprepareLofHEPESBuffer(1M,7.5pH):ChangethevalueinthetextboxabovetoscaletherecipevolumeTable1.RequiredcomponentsComponentAmountConcentrationHEPES(mw:238.30g/mol)238.3g1MPrepare800mLofdH2Oinasuitablecontainer.Add238.3gofHEPEStothesolution.AdjustsolutiontodesiredpHby10NNaOH.AdddH2Ountilvolumeis1L.于4摄氏度保存。云南登记号HEPES生产厂家国内艾伟拓稳定供货注射级HEPES。
脂质体分散在由HEPES缓冲液、氯化钠和注射用水组成的缓冲水溶液中。在成品生产过程的初始阶段,盐酸伊立替康三水合物活性物质溶解在葡萄糖溶液中。随后将其与脂质体混合,通过主动载***式,沉淀并在脂质体中封装为伊立替康八硫酸蔗糖盐。盐酸盐反离子被蔗糖酸盐取代,在脂质体内形成伊立替康蔗糖酸盐。蔗糖酸盐与活性物质包封在脂质体中。成品药物的关键质量参数为:外观、伊立替康鉴定、脂质鉴定、胆固醇鉴定、伊立替康浓度、药物包封百分比、伊立替康杂质、脂质杂质、残留溶剂、细菌内***、生物负荷及无菌性、药物与磷脂比、磷脂与胆固醇比、容器内可提取体积、体外释放、渗透压、粒径、粒径分布、注射颗粒物、pH值、ζ电位。
Tris-HCl缓冲液缺点:1、温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.42、pH值受溶液浓度影响较大,稀释十倍,pH值的变化大于0.1;3、对某些pH电极发生一定的干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。4、易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封。HEPES缓冲液HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。HEPES缓冲液优点:pKa值介于6.0和8.0之间;在水中具有高溶解度;具有膜不透性,不易穿透生物膜;对生化反应影响有限,可耐化学和酶解作用,且不与金属离子生成复合物或沉淀;有极低的可见光和紫外光吸收;离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;HEPES缓冲液缺点:如果将HEPES水溶液暴露于环境光下三小时,会产生细胞毒性的H2O2;HEPES水溶液必须远离光线以免影响实验结果;而配置成溶剂后,要在4℃下保存,建议在短期内使用效果更佳;HEPES粉末放置的时候一般放于干燥的室内,不能直接长时间照射阳光。AVT稳定供货注射级HEPES。
制剂研发、医学检测,药物生产与保存以及分析实验等,几乎都需要缓冲溶液的参与才能正常进行,同时所需要的缓冲液又各有不同。因此对于制剂研发人员来说,只有掌握缓冲溶液的相关知识及用途,才能正确地根据实际需要选择一定浓度和pH值的缓冲溶液来使用。在选择缓冲溶液时,既要考虑它的毒性、稳定性、有效的缓冲范围,还要考虑所选缓冲溶液是否与主体物质反应、对主体物质的干扰性以及是否与主药发生配伍禁忌等。经过上述分析,在四种常见缓冲体系中,Tris-HCl缓冲溶液和HEPES缓冲液是较为理想的生物缓冲剂,在抗体药物,mRNA疫苗,脂质体药物等生物制剂中均有所应用,但都有一定的限制,制剂开发时需进行充分考量及比对。国内艾伟拓注射用HEPES已登记!河北药用HEPES价格
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HEPES缓冲溶液具有对细胞无毒性、不易穿过生物膜、不参与细胞内生化过程等特点,所以在生化实验中具有***的应用,如可用于开放式细胞生长、细胞的长期观察、RNA或DNA提取试剂盒中。其次,相关研究表明以HEPES溶液做缓冲液有利于多肽在金纳米粒子表面的偶联反应。另外,HEPES缓冲溶液对镁生物降解影响的相关实验表明,HEPES能提高镁的生物降解性以及抑制镁不溶盐层的形成。具体应用方面,如盐酸伊立替康脂质体注射液(Onivyde)。艾伟拓山西7365-45-9HEPES需求
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