湖南实验室培养基制备仪

固体斜面培养基配制步骤：1、培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外，一般均应尽量收集有关资料，加以比较核对，再依据自己的使用目的，加以选用，记录其来源。2、培养基的制备记录：每次制备培养基均应有记录，包括培养基名称，配方及其来源，和各种成份的牌号，较终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。3、培养基成分的称取：培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱，较好一次完成，不要中断。可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方面军做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。完全称取完毕后，还应进行一次检查。有的培养基还含有素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。湖南实验室培养基制备仪

培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎（现试管一般多有用螺旋盖者）。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基较终pH之用。湖南实验室培养基制备仪液体培养基，固体培养基的对应词，是微生物或动植物细胞的液状培养基。

培养基制备的九个步骤关注要点：步骤一：称取数量：用1/100的电子天平称出培养基所需的药物。首先参照配方计算出配制相应培养基需要各成分的数量，然后用电子天平准确称取重量。步骤二：培养基溶化：将培养基纳入烧杯容器中，加小适量的水，缓慢加水并用玻璃棒小幅度搅拌。倘若培养基中不含琼脂，则不需要对培养基加热；相反含有琼脂，就需要用本生灯/电磁炉加热煮沸。步骤三：调培养基pH：虽然培养基中含有缓冲物质，可以尽量使培养基的pH值保持在标准范围内，但如果配制的培养基不能要求，则必须进行必要的调整。如果您有校准过的pH计，则可以使用pH计。步骤四：培养基过滤：如果对配制的培养基没有特殊要求，这一步可以省略。步骤五：培养基分装：准备好的培养基根据用途不同分为烧瓶、试管等容器，分装试管量大采用自动分液器，分装试管量小，可以用漏斗分液。确定这批培养基的较终pH值。步骤六：培养基灭菌处理：分装完成的培养基应马上灭菌。

培养基灭菌方法有哪五种类型：1、辐射灭菌原理方法：辐射灭菌原理：是用高能电磁辐射和细菌核酸的光化学反应引起细菌死亡。常用的是紫外线，X射线和伽马射线。主要用于室内空气和器皿的表面消毒。2、干热灭菌原理方法：干热灭菌原理：是采用高温氧化微生物，使蛋白质变性并浓缩电解质以杀死微生物。3、化药灭菌原理方法，化药灭菌原理：使用化药与微生物细胞中的成分发生反应，从而使蛋白质变性酶失活。4、过滤灭菌原理方法：过滤灭菌原理：是使用不能渗透的微生物滤膜进行灭菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的细孔滤膜对压缩空气，酶溶液和其他对热不稳定的复合溶液进行灭菌。5、湿热灭菌原理方法：在工业生产中，用于灭菌对于培养基，管道和设备，通常将蒸汽加热到一定温度并保持一段时间，这称为湿热灭菌。湿热灭菌原理：是直接用蒸汽进行灭菌。蒸汽冷凝后会释放出大量潜热。蒸汽具有强大的穿透力，破坏细菌蛋白质和核酸的化学键，使酶失活并杀死由于代谢紊乱引起的微生物。微生物只有在营养物质浓度及其比例合适时才能良好生长。

马铃薯培养基的制作过程：(1)称量和熬煮：按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。(2)加热溶解：把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。(3)分装：按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。(4)加棉塞：培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。异养微生物的合成能力较弱，不能以CO2作为碳源或主要碳源，故应在培养基中至少添加一种有机物。湖南实验室培养基制备仪

要根据不同微生物的营养需求选择适宜的营养物质，配制针对性强的培养基。湖南实验室培养基制备仪

培养基的配置应该注意的几大步骤：常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净，晾干后备用。（1）平皿用纸或布包好，或装在金属盒内，于121℃高压蒸汽菌3min后烘干，备用。（2）试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好，再用布或报纸包扎好，121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干，备用。（3）吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端（防止污染物吸出，或橡皮帽内的气体污染），然后用纸包后或装入金属吸管筒内，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。其他玻璃器皿均应按上法处理，也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后，备用。湖南实验室培养基制备仪

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