一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法:随着现代医学的发展,各种医用耗材的更新换代也是日新月异。止血材料是常见的医疗器械产品。但是现今市面上的止血材料不光存在着容易引起伤口传染的缺点;同时还存在着容易与伤口粘附不易去除,导致伤口溃烂,或者因为粘附导致传染;再次就是止血材料多是通过吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,很少有止血材料是使用能够自身具有止血性质的材料来生产的。现今市面上的可吸收止血材料有氧化纤维素、α -氰基丙烯酸酯类组织胶、医用止血明胶等,但是都有各自的缺点。如氧化纤维素可引起组织周围PH值升高;α -氰基丙烯酸酯类组织胶降解过程中释放出氰和甲醛等有毒物质;医用止血明胶黏附性较差,易脱落,因其吸收血液后膨胀可能压迫伤口周围组织等。一种基于鼠尾胶原蛋白:根据权利要求1所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料。广州鼠尾胶原销售厂家
鼠尾胶原蛋白的提取方法:1.将黏稠的胶体溶液进行高速冷冻离心处理,收集上清液;在冰水浴中,用的3〜6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中,不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出,4°C沉淀10小时,去除上清液,絮状溶液高速冷冻离心处理,收集沉淀2.用0.03〜0.06mol/L的柠檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,调节pH = 6.5,用的3〜6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中,不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出,4°C沉淀10小时,去除上清液,去除上清液,絮状溶液高速冷冻离心处理,收集沉淀。宁波鼠尾胶原厂家供应鼠尾胶原对前庭毛细胞具有良好的贴壁黏附促进作用。
胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同,每一条亚基形成一股左手旋转的螺旋,其中每 3个氨基酸残基形成一圈螺旋。3 条左手螺旋再扭在一起形成一个右手大螺旋。这样的螺旋称为 3股螺旋。小的甘氨酸残基位于3股螺旋内部。3股螺旋式的棒状胶原分子的大小约是3000×15埃,这些棒状分子首尾相连,并侧向排列形成胶原微丝(其直径可从50埃至数千埃)。胶原分子在两端及沿轴向每隔 680埃的距离存在极性区,这些极性区能和重金属离子结合,使胶原纤维在电子显微镜下形成间距为680埃的明暗相间的特征性的横纹结构。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。
I型鼠尾胶原是借鉴Navneeta Rajan, Jason Habermehl法,经过乙酸抽提、离心、灭菌、透析等步骤制备得到的高纯度、高活性胶原蛋白,属于医药级别产品,可用于包被细胞培养器皿(单分子层包被),适合多种类型细胞的贴壁如肝脏细胞、神经节细胞、胚胎细胞、肌细胞、肺细胞、神经鞘细胞等。I型胶原蛋白包被细胞培养板,规格为6/24孔板,表面经I型胶原蛋白包被,可以很好的降低蛋白质的吸附。使用这种细胞培养板培养细胞,可以获得良好的细胞贴壁率,细胞增殖速度快,形态均一,细胞培养成功率高。使胶原纤维在电子显微镜下形成间距为680埃的明暗相间的特征性的横纹结构。
胶原蛋白分离提纯实验方案:提取鼠尾胶原蛋白的实验步骤: 1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液对初步处理的鼠尾腱进行 酶解, 持续一段时间待混合物变成无色、 透明、 粘稠液体后即可在 4℃, 5000g 的离心力下离心 20min, 收集上清即为粗制鼠尾胶原蛋白原液。 2、将一定浓度的氯化钠溶液加入其中,持续搅拌直至白色絮状沉淀 从溶液中析出,继续加入氯化铵直至沉淀不在析出为止,4℃,5000g 的离心力下离心 20min 后获得白色沉淀。 沉淀物加入一定浓度的醋酸 溶液中溶解。 3、将溶解后的鼠尾胶原蛋白溶液继续反复进行盐析处理,重复步骤 2 的过程 2~4 次。 _x000c_鼠尾胶原蛋白经 SDS- PAGE 蛋白质电泳。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三个月以上的时间。济南鼠尾胶原单价
胶原蛋白按其应用可以分为食品级、一般级、医药级。广州鼠尾胶原销售厂家
生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法,采用酸法与酶法相结合的工艺,保持恒低温无菌的环境,利用同样浓度的盐溶液进行两次盐析与离心,简化了提纯步骤。所用酸为低浓度酸溶液,并采用柠檬酸替代醋酸进行提纯。从提取原料到样品生成过程中,进行多次真空冷冻干燥,并经进一步处理获得含水率在3%以下的胶原蛋白微粉;较后由灭菌、无菌包装,成品胶原蛋白粉末的纯度在98%以上。本发明获得的胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了产率和生物相容性,降低了成本,适用于生物医用材料,所得到的胶原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋结构。广州鼠尾胶原销售厂家