Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南 亲和纯化 用于纯化GST•Tag,His•Tag等重组表达蛋白及抗体,适合~0.5 mL裂解液操作 6次低速离心,总耗时~100分钟(含65分钟孵育时间) 1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。 1,000×g离心1 min。 2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。 3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。 4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。 外泌体用于细胞学或动物实验前的无菌处理 已经经过上述方法制备的外泌体在进行细胞或动物实验之前还需进行一步除菌过滤,这个时候考虑到得率,应该采用离心法处理,以减少过滤时的外泌体样品损失。 超滤方法纯化具体操作步骤举例 Amicon® Ultra-15 超滤管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip®真空抽滤对样品进行澄清[目录号SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]根据您的具体需求选择不同的超滤浓缩管设计。杨浦区Millipore超滤浓缩管代理价
用于搅拌式超滤杯的Ultracel®预切超滤膜片 Ultracel® 再生纤维素膜可以用来对较为稀释的溶液进行脱盐或浓缩。Ultracel® 膜是亲水性的,微观结构紧密,确保对蛋白、核酸等大分子吸附比较低而回收率比较高。 *膜的常规截留分子量分为1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直径分为25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 对于大体积、高浓度(如蛋白浓度大于 1.0 mg/mL)的样品进行脱盐和浓缩,Biomax®聚苯醚砜(PES)超滤膜是很好的选择。血清、血浆或条件组织培养基等,都是 Biomax®超滤膜适合处理的样品。 *膜的常规截留分子量为5,10,30, 50, 100, 300和500kDa等。 *膜直径分为25,44.5,47,63.5和76mm。无锡超滤浓缩管报价那么超滤浓缩管施工的优势都有哪些呢?
Millipore超滤浓缩管设有反转离心回收设计使蛋白样品,特别是小体积样品回收,避免吸头吸取造成的样品丢失或操作错误; 其中0.5mL、2mL 和 70mL 超滤管设计为反转回收模式样品吸附损失小; 合理的死体积设计,避免样品离干而降低回收率; 能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻松。 有效浓缩同时保证高的蛋白回收率 设计精巧、紧凑,一体化结构确保不会发生渗漏,即使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作。
核苷酸截留分子量(NCO) 超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的,适合各种蛋白研究,但在核酸 和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏 过,相对于球形蛋白需要更致密的膜(截留分子量更小)。所以选择 滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。 浓差极化 浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞,产生除了膜本身截留分 子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时,会形成相当于第二层滤膜作 用的胶体层,干扰分子通过滤膜,同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分 也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。超滤浓缩管具体报价多少呢。
蛋白复性,温和透析 D-Tube™ 透析管 如果样品很敏感而难以处理,采用温和的透析方法可以避免其在过度浓缩时发生沉淀和离心操作剪切力对样品的损害。。D-Tube™是双膜设计的透析管,**提高了样品透析表面积,在2-5小时内即可完成透析,是非常温和而高效的缓冲液置换工具。D-Tube™ 透析管的独特优点: 样品回收率> 89% • 膜和管壁皆为低吸附性材质,增加样品回收率可靠而易用 • 不会像使用夹子或打结那样造成样品渗漏和污染,安全可靠 旋盖式设计,易于打开和关紧 硬管设计,易于更充分地吸取、移走样品,即使是μL级样品加样方便,功能多样 • 采用标准***头加样,而非注射器和针头加样,减少膜破损的风险提供的浮漂适合在常见的广口烧杯中使用,方便在透析过程中换液D-Tube™ 透析管还可以用于从琼脂糖或丙烯酰凝胶电洗脱样品益启生物公司主要超滤浓缩管代理销售。虹口区默克0.5ml超滤浓缩管报价
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外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体:300μg样品(相当于300μg总蛋白)用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释,与protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上(以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰),请参考默克磁珠操作说明书。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推荐使用试剂目录号信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准,相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心,用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题,真是惠而不费,不亦乐乎?杨浦区Millipore超滤浓缩管代理价
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